產品詳情介紹
來源:人源
組織來源:肝臟
生長狀態:貼壁
完全培養基:DMEM(Code#FI101)+10%FBS(Code#FS501)+Penicillin-Streptomycin(100×)(Code#FG101)
培養條件:37℃,95%潔凈空氣+5%二氧化碳
細胞復蘇:
將細胞從液氮中取出,迅速置于37℃水浴鍋中,并輕輕晃動。待凍存的細胞融化成只有綠豆大小的冰球時,迅速移至細胞工作臺,將細胞移入15 ml離心管中,加入預熱的完全培養基3-6 ml,輕輕混勻,500-800 rpm離心5-10 min,小心地移去上清。使用3-15 ml培養基重懸細胞,再輕輕的混勻細胞,接種至合適的新培養介質中。
細胞傳代:
以6孔板為例,將細胞培養基移去,使用無鈣鎂PBS(Code#FG701)小心地清洗細胞1-3次,移掉PBS,加入0.5-1 ml 胰酶(Code#FG301),37℃培養箱孵育1-3 min,在倒置顯微鏡下觀察,大部分細胞變圓且沒有細胞或僅有少量細胞脫落時,使用3-6 ml完全培養基中止消化,輕輕的混勻細胞,傳代至合適的新培養介質中。如果細胞狀態較差,在中止消化后,500-800 rpm離心5-10 min,去除上清,使用合適量的培養基重懸細胞,再輕輕的混勻細胞,傳代至合適的新培養介質中。
傳代比例:1:3-1:5
傳代間隔:每3-5天傳代一次
凍存培養基:TransStem? Chemically Defined Xeno-free Cell Cryopreservation Medium-Protein Free(Code#MC102)
細胞凍存:
以6孔板為例,待細胞匯合度為90%左右、細胞數量為1-2×106個細胞時,移去細胞培養基,使用無鈣鎂PBS(Code#FG701)小心地清洗細胞1-3次,移掉PBS,加入0.5-1 ml 胰酶(Code#FG301),37℃培養箱孵育1-3 min,在倒置顯微鏡下觀察,大部分細胞變圓且沒有細胞或僅有少量細胞脫落時,使用3-6 ml完全培養基中止消化,輕輕的混勻細胞,500-800 rpm離心5-10 min,去除上清,使用1 ml凍存培養基輕輕的重懸細胞,將細胞移入凍存管中,標記并放入4℃預冷的凍存盒中,置于-80℃,冷凍過夜。次日取出放于液氮中長期保存。



